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植物提取物母液制备流程及测定

来源:nmflyz.com 发布时间:2018年06月23日
1.2.1 植物提取物母液制备
  博落回母液:称取1.00 g博落回散加入9 mL无菌水中,混合均匀,制成10%母液;
  肉桂醛母液:称取1.00 g肉桂醛加入4 mL二甲基亚砜中,混合均匀,超声波超声30 min,制成20%母液;
  香芹酚母液:吸取1 mL香芹酚加入4 mL二甲基亚砜中,混合均匀,制成20%母液。
1.2.2 牛津杯琼脂扩散测定抑菌圈
  将博落回母液用无菌水稀释至5%、1%、0.1%、0.01%。植物提取物供应商应该保证实验室的设备符合实验条件。
  将肉桂醛、香芹酚母液用二甲基亚砜稀释至5%,再用无菌水稀释至1%、0.1%、0.01%。
  将二甲基亚砜用无菌水稀释至5%、1%、0.1%、0.01%,作为不同浓度的试剂空白对照。
  在超净台里,用无菌接种环挑取一环副溶血弧菌菌苔接种于2216E培养基中180r/min 30 ℃振荡培养12-18 h,稀释10-100倍,以布满平板又不过浓为准,取100 μL涂布于2216E平板上,用无菌镊子夹取牛津杯放于涂好的平板表面,每皿放置4个,分别加200 μL 5%、1%、0.1%、0.01%的不同植物提取物试样,每种三个平行。将平板轻放于恒温培养箱中,30 ℃培养12-24 h观察抑菌圈,用游标卡尺测量直径。

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